近期，美国德克萨斯大学 M.D.Anderson 癌症研究中心的 Thompson 教授和 Wierda 教授就检测 MRD 的方法及其应用、发展前景等方面进行了综述，文章发表在 Blood 杂志上。
对于化学免疫治疗（CIT）后的慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者而言，体内微小残留病（MRD）负荷是用于预测其复发可能性的最好指标。MRD 是指患者体内通过常规影像学和实验室检查无法发现的微小病灶，需要通过更灵敏的流式细胞学和分子技术来检测。不管患者化疗前的临床状况如何，若能达到无微小残留病负荷，则预示着患者将进入无进展生存期（PFS）。
目前可用于检测 CLL 患者体内 MRD 的方法主要有流式细胞术（FLC）和基于 PCR 的分子技术。由于基础三色荧光 FLC 灵敏度较低，故现多采用多色荧光 FLC ，其优点在于能在大多数临床 FLC 实验室开展并且结果可定量。然而其灵敏度低于基于 PCR 的分子技术，并且其结果常受到受检白细胞总数影响。
基于 PCR 的分子技术包括使用通用引物与人免疫球蛋白重链可变区（IGHV）基因的恒定区域结合进行扩增检测、使用等位基因特异性寡核苷酸（ASO）探针进行实时定量 PCR（RQ-PCR）、将 ASO 与通用引物结合进行 PCR（nested ASO IGHV PCR）以及在使用通用引物进行 PCR 扩增基础上进行高通量测序（HTS）等。
这些分子技术的优点在于有较高的灵敏度，所需标本量较少以及由于 DNA 在室温下稳定，故可对较久以前的标本进行检测。除此之外，PCR 基础上的 HTS 还可对无细胞血浆中的DNA进行检测，由于该部分 DNA 主要由肿瘤细胞坏死或凋亡引起，对评估血管外残留病灶有很大意义。
临床实践中，对于治疗后仍存在 MRD 的患者可根据残留病水平选择强化、巩固或维持治疗。而对于早期达到 MRD 阴性的患者，应及时停止后续治疗，既可达到长期无进展生存又可避免药物毒性蓄积。
将 MRD 阴性作为 CLL 治疗终点将带来怎样的影响？
首先，长时间的无进展生存期（PFS）将使患者免于接受维持治疗，从而避免了药物毒性蓄积以及减轻了患者经济负担。其次，患者体内无 MRD 负荷，将大大减少耐药突变的可能。最后，以 MRD 阴性作为化疗终点或可逆转 CLL 细胞引起的免疫异常。值得注意的是，能带来该逆转效应的化疗方案常伴有很大药物毒性。
将 MRD 检测用于指导临床还需解决以下问题：
最佳取材部位在哪？
既往研究显示，外周血的 MRD 检出率常低于骨髓，因此骨髓的阴性预测值较有意义，而对于高风险患者能否在巩固或维持治疗中获益，外周血的阳性预测值较有意义。CLL 为多发性病变，基于HTS的血浆检测有利于血管外部位 MRD 检出。
患者治疗前临床情况是否会对 MRD 结果造成影响？
研究显示，治疗前高风险患者（如 ZAP70 阳性、IGHV 未突变、含 del（11q）等）以及未接受有效治疗的患者达到 MRD 阴性可能性很小，该部分患者预后较差。
临床分期与 MRD 结果存在分歧时怎么办？
一些研究中临床分期为部分缓解期（PR）的患者常 MRD 阴性，而这些患者的 PFS 与完全缓解期（CR）且 MRD 阴性患者的 PFS 无明显差异。因此 MRD 阴性缓解比临床 CR 更有意义，对淋巴结进行活检或者使用更先进检测技术或许可解决上述分歧。
除此之外，由于新药临床试验中 PFS 作为终点指标需要长时间随访，而 MRD 阴性与 PFS 有很强的相关性，故 MRD 或许可替代 PFS 作为临床试验的终点指标。然而在一些很少达到 MRD 阴性的新药试验中，该替代将受到限制。
总而言之，化学免疫治疗后 MRD 阴性意味着无进展生存期与总体生存期提高。要想将 MRD 用于指导临床，我们还需发展更敏感和特异的方法来检测 MRD ，并且需要更多研究来验证以 MRD 作为 CLL 治疗终点的有效性。
