依鲁替尼治疗CLL一例

2014-06-10 08:20 来源:丁香园 作者:shumufeng
字体大小
- | +

依鲁替尼(Ibrutinib)是一种可共价结合于布鲁顿酪氨酸激酶(BTK)c481位点的抑制剂,已证明用于复发和难治性慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者可产生显著缓解。然而,有5.3%的患者最终出现疾病进展,主要的抗性机制未知。本文研究者就下面一个病例阐述了耐药机制。

患者,女,49岁,于2000年诊断为CLL。既往经多次治疗失败后,患者从2010年开始接受依鲁替尼治疗,剂量为560毫克每日(进入依鲁替尼治疗B细胞癌剂量递增研究的第一期)。到第11个月患者出现部分缓解,每立方毫米绝对淋巴细胞计数达到4530。计算机断层扫描18个月时发表淋巴结肿大有明显缩小但不能完全复原。

21个月后,患者淋巴细胞计数快速升高,淋巴结肿大显著进展。尽管剂量递增至每日840毫克,在接下来的4周内白血病仍持续进展。给予依鲁替尼前采集外周血标本(—52天)。第472天、首次注意到疾病进展的第589天以及第616天剂量增加前均观察到患者对药物出现应答。图中的附录显示在治疗过程中对患者的淋巴细胞绝对计数的样本采集日期。

RNA测序揭示BTK的互补DNA(cDNA)的胸腺嘧啶核苷酸1634的腺嘌呤突变(GenBank登录号nm_000061.2),481位的半胱氨酸替代为丝氨酸(c481s)。对样品进行突变检测时,首先在疾病进展后的样本中发现了突变(88%),剂量递增后的样本中也发现有突变(92%),但给予依鲁替尼前和患者缓解中的样本中未见突变。

未甄别出有关患者临床进程的BTK类似的的其他遗传突变。 cDNA 桑格测序证实仅复发期样本检出突变。更灵敏的等位基因PCR方法检出复发期样本中存在突变,而依鲁替尼给药前或患者缓解期样本中未见突变。

依鲁替尼共价结合BTK活性位点中的c481巯基,导致它的激酶活性发生不可逆的抑制作用。结构建模提示c481s突变会破坏这种共价结合,变不可逆的结合为可逆结合(图)。


图 布鲁顿酪氨酸激酶(BTK)c481s突变对依鲁替尼结合和抑制BTK磷酸化能力的影响。依鲁替尼是一种靶向制剂,可选择性地抑制布鲁顿酪氨酸激酶(BTK),该酶是至少三种关键B细胞生存机制的重要介质。布鲁顿酪氨酸激酶的这种多重作用可以使其指挥B细胞恶性肿瘤进入淋巴组织,使肿瘤细胞能够接触必要的微环境而得以生存。美国食品药品监督管理局(FDA)已授予依鲁替尼“突破性”地位用于治疗两种B细胞恶性肿瘤:复发或难治性套细胞淋巴瘤(MCL;既往经过治疗的患者)及Waldenstrom巨球蛋白血症(WM)。

 

荧光标记的依鲁替尼结合非突变BTK激酶,共价结合后可电泳鉴定,而BTK c481s或c481a突变位点则不能。这表明形成共价键的关键是半胱氨酸(附录中图S4)。

磷酸化的BTK(py223)反映了BTK激酶活性。将重组非突变和 BTKc481s转染入HEK 293细胞,表明 C481S BTK在Y223点的磷酸化可显著减少依鲁替尼抑制的敏感性。

总之,我们的数据表明,C481S突变破坏BTK与依鲁替尼之间的共价结合。受损的结合导致BTK酶活性降低,最终导致依鲁替尼抵抗性的发生。这一发现与woyach等的报告一致。我们的研究从遗传学角度证实,BTK是依鲁替尼药理学作用靶点。

查看信源地址

编辑: 李林栋

版权声明

本网站所有注明“来源:丁香园”的文字、图片和音视频资料,版权均属于丁香园所有,非经授权,任何媒体、网站或个人不得转载,授权转载时须注明“来源:丁香园”。本网所有转载文章系出于传递更多信息之目的,且明确注明来源和作者,不希望被转载的媒体或个人可与我们联系,我们将立即进行删除处理。同时转载内容不代表本站立场。